CellenONEはフランスEnhancing Life社が新たに導入した単細胞配列測定及び単細胞クローン領域の前期獲得単細胞との全自動選別システムであり、市場でよく見られる伝統的なフローサイト選別器と比べて、CellenONEは任意の小サンプル数の1µl回収率の高い細胞懸濁液を処理することができ、FACSは通常単細胞分離のために少なくとも2万個の細胞を必要とするが、CellenONEは50個の細胞から細胞を分離することができ、選別後の細胞活性はFACS選別の細胞より高い。システム全体を冗長に設定する必要はありません。3～5分で自動隔離運転を開始でき、実験者の長時間の監視を必要としません。

√温和で高精度な圧電音響分配技術に基づく

√ディスペンサノズル内の細胞の自動光学モニタリング

√各サンプルに基づいて、機械は分配ステップを測量・製図する

√分配後の単細胞は高活性

√細胞の位置は単細胞条件を満たすかどうかを決定し、それによって次の液滴中で選別されるかどうかを決定する

私たちは非常に簡単なプロセスを開発しました。私たちのガラス毛細管に基づくPDC技術を用いて、少量のミクロンの細胞懸濁液を吸収することができて、ほとんど死んだ体積がありません。その後、特許の分配／イメージング技術を用いて、1滴当たりの薬液の分配状況を監視した。我々のPDC分配技術は通常100〜300ピコリットルの液滴体積を分配する。各液滴がイジェクトされるので、単一のユニットが存在するかどうかを監視します。細胞が存在する場合は、選択したターゲット血管に保存します。マイクロユニット、マイクロプレート、スライド、その他のお気に入りのものかもしれません。液滴に細胞がない場合や、複数の細胞がある場合は、貴重な希少細胞が無駄にならないように液滴を回収します。

さいぼうせんべつ

単細胞採取

細胞クローン増幅

細胞組織特異性の研究

NGSグループ学的解析

HuBBTM技術は非常に強力なB細胞永生化システムであるが、永生化B細胞の10%しかクローン化に成功していないため、データは非常に限られている。HuBBTMとCELLEN ONEの結合により、クローンの効率が90%に大幅に向上し、大量の時間を節約し、最も優れたクローンの識別を確保した。

目的：mAb発育に用いられる細胞をクローニングする能力（例えばCHO、ハイブリドーマ）を展示する

困難：単独で分離・培養した細胞のモノクローナル性と生存能力の確保

CellenONE方法：顕微鏡担体上に単細胞を印刷し、モノクローナル性を検証し、クローン回復/生存はモノクローナルを96ウェルプレートに分配し、7日後にn個のコロニー/生存を計数する。

1.比較目的：BD facsaria 3とCellenONEX 1のクローン回復状況を比較する

2.実験細胞：GFP陰性報告遺伝子と薬剤耐性遺伝子融合関連遺伝子を有するCHO細胞転化。実験時、CHOsの70%はGFP陰性であった。

3.実験詳細：クローンは96ウェルプレートで行い、各ウェルと200μl培地でアドレナリン選択性抗生物質を補充した。培養5日後、単コロニーの少なくとも5つの細胞の孔数は陽性であった。（GFP+クローンは選択的存在により淘汰される）

4.予想される結果：

i.FACS分類後の成功率が100%（GFP+veを除く）

ii.CellenONE選別後の成功率70%。

5.実績：

CellenONE技術パラメータ：

1.調剤技術：圧電音のオンデマンド

2.分配体積：1滴あたり50-800 pL

3.X/Y直線駆動、Z軸駆動

4.分解能：1μm

5.精度（絶対位置）：＜10μm

6.精密（繰り返し位置）：＜3μm

7.最速速度：100 cm/秒

8.Spottable領域（ミリ）：x = 180;y＝120（2微量滴定板）

9.サイズLxWxH（mm）：740 x 750 x 1580、重量205 kg