製品の概要

ソレボ製トリプシン−EDTA消化液（Trypsin−EDTA Solution）は0.25%トリプシンと0.02%EDTA（0.53 mM）を含み、カルシウムマグネシウムフリー平衡塩溶液に溶解し、ろ過除菌することにより、培養細胞と組織の消化に直接使用することができる。本製品は便利で迅速、安定で安全、細胞状態が良いなどの特徴がある。

製品の説明：

組織細胞のインビトロ培養及び初代細胞培養における組織細胞分散（組織塊を単一細胞懸濁液に調製する）及び継代細胞培養において、壁貼り成長細胞の消化分散はいずれも組織細胞消化液を用いなければならない。一般的な消化液はトリプシン、EDTAなどであり、その機能は主に細胞間のタンパク質（例えば細胞外基質）を加水分解し、組織または壁貼り細胞を単一細胞に分散させ、細胞懸濁液を作製して更なる実験に用いる。

保存：-20℃保存、有効期間12ヶ月。

使用方法：

1.壁貼り細胞の消化：

a）培養液を吸引除去し、無菌のPBS、Hanks液または無血清培養液で細胞を1回洗浄し、残存血清を除去する。

b）少量のトリプシン消化液を添加し、細胞を蓋をすればよく、室温で1〜2分間放置する。細胞によって消化時間が異なり、壁にしっかりと張り付いた細胞に対して消化時間を適切に延長することができる。

c）顕微鏡下で観察し、細胞は明らかに収縮し、そして肉眼観察培養器底部で細胞の形態に明らかな変化が発生した、あるいは銃で細胞を吹き付けることで、細胞がちょうど吹き落とされることができることを発見します。このとき消化液を吸引除去する。血清を含む細胞培養液を加え、細胞を吹き付け、そのまま後続の実験に使用することができる。

d）消化不足が見つかれば、トリプシン消化液を加えて再消化することができる。

e）もし細胞の消化時間が長すぎて、細胞を吹き付けることができなければ、細胞はすでに部分的に直接培養器の底から脱落して、直接膵酵素細胞培養液で細胞を全部吹き落とす。1000-2000 gを1分間遠心分離し、細胞を沈殿させ、できるだけ膵酵素細胞消化液を除去した後、血清を含む完全培養液を加えて細胞を再懸濁し、後続の実験に用いることができる。

2.組織の消化：

組織によって消化する必要がある時間は大きく異なり、通常は消化後に組織を十分に分散させることができることが望ましい。

注意事項：

1.組織や細胞の性質が異なるため、実験者は具体的な状況に基づいて、最適な消化時間を決定しなければならない。消化細胞の時間は長すぎるべきではなく、そうしないと細胞の壁と成長状況に影響を与える、

2.本製品は細菌抑制剤を含まず、使用中に特に無菌操作に注意し、消化液が微生物に汚染されないようにする。

3.4℃の長期保存は適切ではなく、繰り返し凍結融解してはならず、少量使用の場合は分装凍結保存を提案する。

4.安全と健康のために、実験服を着て使い捨て手袋をはめて操作してください。